《大熊猫輪狀病毒熒光定量PCR檢測方法的建立與應用》等4個項目通過結題驗收

　　近日，由成都大熊猫繁育研究基地承担的《大熊猫轮状病毒荧光定量PCR检测方法的建立与应用》等4个项目通过结题验收。验收专家听取了项目执行情况的汇报，审阅了相关材料，观看了项目成果演示，并进行了质询和答疑。

 

会议现场

 

各项目组代表汇报实施情况

 

各项目组代表汇报实施情况

 

各项目组代表汇报实施情况

 

专家组听取项目组汇报，并查阅相关资料

  

　　1、《大熊猫輪狀病毒熒光定量PCR檢測方法的建立與應用》：

　　（1）建立了大熊猫輪狀病毒感染常規RT-PCR檢測方法，幷用之作爲熒光定量PCR檢測方法的對照檢測方法，評價了熒光定量PCR快速檢測方法的靈敏度。

　　（2）以大熊猫輪狀病毒（GPRV）VP4基因序列設計1對引物，通過條件的優化，建立了靈敏度高、特异性强、重複性好的檢測大熊猫輪狀病毒的熒光定量 RT-PCR方法，其靈敏度可達1.0×100拷貝/μL，比常規 RT-PCR靈敏度高出100倍。

　　（3）用建立的方法對部分圈養大熊猫幼獸出現急性腹瀉死亡病例進行跟踪調查，發現幼獸死于輪狀病毒感染；對野生大熊猫糞便樣本進行診斷，發現其輪狀病毒陽性率爲1.7%，存在于邛崍山系；對圈養大熊猫進行輪狀病毒感染調查，發現輪狀病毒携帶率從11.61%（2015年）上升至27.27%（2016年），呈上升的趨勢。

　　該項目已發表論文3篇（CSCD）,獲得發明專利1項。

 

　　2、《提高圈養大熊猫種群健康和繁殖能力的技術研究》：

　　（1）通過對中毒大熊猫種群的獸醫學輔助治療幷采用新型飼養管理模式,在一年的時間裏將中毒大熊猫種群的健康和繁殖力恢復到正常健康水平。

　　（2）通過對患慢性營養不良綜合症大熊猫開展包括血液學、細菌學、病毒學、寄生蟲學和病理組織學跟踪研究，確認大熊猫慢性營養不良綜合症的發病原因爲動物源性蛋白質過敏。

　　（3）根據慢性營養不良綜合症大熊猫的發病原因幷結合野生大熊猫的生物學特點，成功篩選出以甲硝唑爲脫敏藥物配合腸道營養液的治療新措施，對該病的治愈率達到100%（8/8）。

　　（4）研製完成的以全植物源性蛋白替代傳統動物源性蛋白組成的精飼料飼養模式，不僅將圈養大熊猫種群的排粘頻率由傳統的2.28次/月降低到0.06次/月,而且將種群健康提高到了歷史最高水平，建立了圈養大熊猫飼料安全監測和品質管理體系,確保了大熊猫種群食品安全。

　　（5）采用伊維菌素和噻酚嘧啶交替使用的寄生蟲病防治新措施，將圈養大熊猫蛔蟲感染率由傳統措施下的68.18%降低到6.25%。

　　該項目已發表論文 7篇，申報專利13項。

 

　　3、《竹子與竹笋中植物雌激素含量以及與大熊猫激素相關性研究》：

　　（1）首次對圈養大熊猫常食竹子（含竹葉、竹杆以及竹笋）木脂素含量進行了測定，發現竹子各個部位木脂素以竹杆含量最高，竹葉其次，竹笋最低。

　　（2）系統地研究了大熊猫采食竹葉、竹杆和竹笋期間木脂素的日吸收量及吸收率，其中大熊猫采食竹杆木脂素日吸收量最高，竹葉其次，竹笋最低；同時對應木脂素吸收率采食竹杆最低，竹葉其次，竹笋最高。

　　（3）系統地檢測了雌性大熊猫一年采食竹葉、竹杆和竹笋期間對應尿液中雌激素含量變化，發現采食竹杆時期與絕大部分雌性大熊猫內源性雌激素啓動同步，而采食竹杆大熊猫能吸收更多的植物雌激素，推測繁殖季節采食竹杆有利于促進大熊猫發情。

　　該項目發表論文1篇（SCI收錄，IF=5.2），培養本科生4名。

 

 

　　4、《雪貂犬瘟熱基因重組疫苗對大熊猫的免疫保護效果研究》：

　　（1）課題組采用國産犬用“百司特”犬六聯弱毒疫苗和美國産雪貂犬瘟熱重組疫苗（PUREVAX(tm) ferret distemper vaccine）分別接種33只和31只不同年齡和性別的健康大熊猫，幷對2種不同疫苗接種後各個不同時期血清中抗CDV和抗體動態變化以及疫苗接種對大熊猫的安全性進行系列研究後首次證明：①國産犬用“百司特”犬六聯弱毒疫苗對大熊猫是安全的，但無法刺激大熊猫産生有效的保護性抗體；②雪貂犬瘟熱重組疫苗接種對大熊猫不僅安全，而且能够刺激所有大熊猫産生有效保護抗體。

　　（2）鑒于大熊猫物種的特殊性和犬瘟熱病對大熊猫種群安全的嚴重威脅，在研究出一種大熊猫抗CD專用疫苗前，課題組推薦將美國産雪貂犬瘟熱重組疫苗作爲全球大熊猫抗CD的預防疫苗。

 

　　驗收專家組認爲以上項目完成了項目批復中規定的主要任務和指標，同意通過驗收。